Dl -1, 4- dithiothreitol 丨 cas 3483-12-3

Dl -1, 4- dithiothreitol 丨 cas 3483-12-3 είναι ένας παράγοντας αναγωγής μικρού μορίου που χρησιμοποιείται ευρέως στη βιοχημεία, τη μοριακή βιολογία και τη βιοτεχνολογία. Διαδραματίζει κρίσιμο ρόλο στη διατήρηση της μειωμένης κατάστασης των πρωτεϊνών, ειδικά εκείνων που είναι ευαίσθητοι στην οξείδωση και τον σχηματισμό δισουλφιδικού δεσμού. Το DTT προτιμάται για πολλές εργαστηριακές εφαρμογές λόγω της ισχυρής μείωσης της ισχύος, της ειδικότητας και της χαμηλής τοξικότητας υπό κανονικές εργαστηριακές συνθήκες.

1. Μείωση του παράγοντα στη βιοχημική έρευνα
√ Σταθεροποίηση δομής πρωτεΐνης
● Το DTT χρησιμοποιείται συνήθως για τη διάσπαση δισουλφιδικών δεσμών σε πρωτεΐνες μειώνοντας τις συνδέσεις κυστίνης (δισουλφιδίου) σε υπολείμματα κυστεΐνης (θειόλη).
● Αυτό βοηθά στην μετουσίωση της πρωτεΐνης, την αναδημιουργία ή την ανάλυση, ειδικά σε τεχνικές όπως το SDS-PAGE, το κηλίδωμα Western και η φασματομετρία μάζας.
√ Ενεργοποίηση και συντήρηση ενζύμου
● Πολλά ένζυμα χάνουν τη δραστηριότητα λόγω της οξείδωσης των κρίσιμων υπολειμμάτων κυστεΐνης. Το DTT βοηθά στη διατήρηση της ενζυμικής δραστικότητας διατηρώντας αυτές τις θειολές σε μειωμένη, ενεργή μορφή.

2. Προετοιμασία δείγματος στη μοριακή βιολογία
√ Απομόνωση RNA
● Η DTT προστίθεται σε ρυθμιστικά λύσης κατά τη διάρκεια της εκχύλισης RNA για την αναστολή των ενζύμων RNase, τα οποία απαιτούν άθικτα δισουλφιδικά δεσμούς για να παραμείνουν ενεργοί.
● Βοηθά στην εξασφάλιση υψηλής ποιότητας RNA για εφαρμογές όπως RT-PCR, qPCR και μεταγραφικό προσδιορισμό αλληλουχίας.
√ Αντίστροφη μεταγραφή (RT)
● Η DTT ενισχύει την αποτελεσματικότητα των ενζύμων ανάστροφης μεταγραφάσης σε σύνθεση cDNA με σταθεροποίηση των ομάδων θειόλης του ενζύμου και διατηρώντας τη βέλτιστη δραστικότητα.

3. Δομική βιολογία και μελέτες αναδίπλωσης πρωτεϊνών
● dl -1, 4- dithiothreitol 丨 cas 3483-12-3 χρησιμοποιείται εκτενώς σε πρωτόκολλα αναδίπλωσης και αναδίπλωσης πρωτεϊνών, καθώς μιμείται το μειωμένο περιβάλλον του κυτοσόλου.
● Επιτρέπει στους ερευνητές να μελετήσουν αλλαγές διαμόρφωσης εξαρτώμενων από δισουλφίδιο, βοηθώντας την κατανόηση των σχέσεων πρωτεϊνικής δομής-λειτουργίας.

4. Λύση κυττάρων και ιστών
● Περιλαμβάνονται σε ρυθμιστικά λύσης λύσης για διαταραχή των κυττάρων για την προστασία των ομάδων πρωτεΐνης θειόλης κατά τη διάρκεια της εκχύλισης.
● Αποτρέπει τα οξειδωτικά αντικείμενα και εξασφαλίζει την ακριβή ανάλυση των ευαίσθητων σε οξειδοαναγωγική πρωτεΐνες.

5. Υπηρεσία οξειδοαναγωγής και μελέτες δυναμικού οξειδοαναγωγής
● Το DTT είναι ένα εργαλείο για τη διατήρηση ενός καθορισμένου περιβάλλοντος οξειδοαναγωγής in vitro.
● Χρησιμοποιείται για την προσομοίωση των ενδοκυτταρικών συνθηκών αναγωγής σε μελέτες που περιλαμβάνουν ευαίσθητες στην οξειδοαναγωγική οδό σηματοδότησης, όπως αυτές που περιλαμβάνουν θειορεδοξίνες και γλουταρεοξίνες.

6. Ροές εργασίας DNA και RNA
● Χρησιμοποιείται σε αντιδράσεις όπου νουκλεάσες ή άλλα οξειδωτικά ένζυμα θα μπορούσαν να αποικοδομήσουν τα νουκλεϊνικά οξέα.
● Βοηθά στην εξασφάλιση καθαρού και αποτελεσματικού χειρισμού DNA/RNA για εφαρμογές κατάντη όπως κλωνοποίηση, επιμόλυνση και αλληλουχία.

√ Ισχυρή και συγκεκριμένη μειωτική δύναμη
● dl {{0}}, 4- dithiothreitol 丨 cas 3483-12-3 είναι ένας ισχυρός αναγωγικός παράγοντας με τυπικό δυναμικό οξειδοαναγωγής -0,33 V, μειώνοντας αποτελεσματικά τους δεσμούς δισουλφιδίου ακόμη και σε χαμηλές συγκεντρώσεις.
√ Σταθεροποιεί ευαίσθητα βιομόρια
● Διατηρεί τη μειωμένη κατάσταση των ομάδων θειόλης, εμποδίζοντας την οξείδωση ευαίσθητων πρωτεϊνών και ενζύμων κατά τον καθαρισμό και την ανάλυση.
√ Συμβατό με υδατικά συστήματα
● Το DTT είναι υδατοδιαλυτή και λειτουργεί αποτελεσματικά σε ρυθμισμένα υδατικά διαλύματα, καθιστώντας το ιδανικό για βιολογικά πειράματα.
√ ελαχιστοποιεί τη συσσωμάτωση πρωτεϊνών
● Με τη μείωση των λανθασμένων δισουλφιδικών δεσμών, το DTT βοηθά στην πρόληψη της λανθασμένης αναδίπλωσης και της συσσωμάτωσης των πρωτεϊνών, βελτιώνοντας την ποιότητα και την απόδοση των καθαρισμένων πρωτεϊνών.
√ Χαμηλή τοξικότητα σε εργαστηριακή χρήση
● Σχετικά ασφαλές να χειριστεί με τυποποιημένες προφυλάξεις εργαστηρίου, καθιστώντας την προτιμώμενη σε σχέση με μερικούς σκληρότερους παράγοντες μείωσης όπως -mercaptoethanol (BME), η οποία είναι πιο πτητική και οσμή.

Σύναψη
Dl -1, 4- dithiothreitol 丨 cas 3483-12-3 είναι ένα ουσιαστικό εργαλείο στην εργαλειοθήκη των ερευνητών της επιστήμης της ζωής, προσφέροντας αξιόπιστη μείωση των δισουλφιδικών δεσμών σε πρωτεΐνες, ένζυμα και νουκλεϊκά οξέα. Η ευρεία του χρήση στη χημεία πρωτεϊνών, τη μοριακή βιολογία και τη βιοτεχνολογία καθιστά απαραίτητη τόσο σε πρωτόκολλα ρουτίνας όσο και σε προηγμένη έρευνα. Παρά την αστάθεια της σε λύση, η αποτελεσματικότητά της και η ευκολία χρήσης της εξασφαλίζουν τον συνεχιζόμενο ρόλο της στην επιστήμη της αιχμής.